Supermarkety ve Velké Británii zavádějí omezení nákupu určitých produktů na základě nových opatření kvůli COVID-19

Supermarkety ve Velké Británii začaly ukládat omezení nákupu řady zboží, aby se zabránilo nedostatku, uvedly britská média.

Zejména řetězec supermarketů Tesco nyní umožňuje jedné osobě zakoupit nejvýše tři balíčky z následujících sérií zboží: mouka, těstoviny, toaletní papír a dezinfekční ubrousky.

Humor u některých produktů vyvolávají nová opatření oznámená začátkem tohoto týdne kvůli koronaviru. Místní obyvatelé se obávají druhého „uzamčení“ – situace, ve které se zastaví společenský život.

Ve čtvrtek Spojené království zaregistrovalo nejvyšší nárůst nových případů koronaviru COVID-19 v zemi od začátku pandemie – za 24 hodin bylo v zemi zjištěno 6,6 tisíce nových případů. O den dříve to bylo 6,1 tisíce.

Tento týden předseda vlády Boris Johnson vyzval Brity, aby „projevili disciplínu a odhodlání“, aby se vyhnuli druhému možnému národnímu zablokování kvůli COVID-19.

Johnson mezitím dříve oznámil zavedení nových omezujících opatření v Anglii pro boj s koronaviry, zejména nutnost převést pracovníky kanceláře na dálkovou práci a zákaz hospod, barů a restaurací po 22:00.

Celkový počet případů koronaviru ve Velké Británii přesahuje 416 tisíc, 41,9 tisíce infikovaných zemřelo.

Ázerbajdžán bude pokračovat v politice posilování průmyslového potenciálu

Rozhovor ministra hospodářství a průmyslu Ázerbájdžánu Shahin Mustafayev “

Rok 2014, který byl v Ázerbájdžánu vyhlášen „rokem průmyslu“, se chýlí ke konci. Jaká opatření přijalo ministerstvo k rozvoji průmyslu?

Rozvoj průmyslu je prioritním směrem socioekonomické politiky prováděné v zemi. Jak víte, na základě dekretu hlavy státu byl rok 2014 v Ázerbájdžánu prohlášen za rok průmyslu. S cílem racionálnějšího využití stávajícího potenciálu pro přeměnu Ázerbájdžánu na silné průmyslové centrum, koordinaci opatření přijatých k rozvoji průmyslu v zemi, urychlení industrializace byl v souvislosti s „Rokem průmyslu“ schválen akční plán.

Otevření více než 40 středních a velkých průmyslových podniků v zemi během roku, zvýšení stávajících výrobních kapacit je výsledkem prací provedených v souladu s akčním plánem. Mezi podniky otevřenými a provozujícími as využitím moderních technologií a zařízení lze zmínit cementárnu, papírnu a lepenku, ropnou továrnu, měďárnu, textilní továrny, solární a vodní elektrárny, potravinářské město a krmivo a ovoce a zelenina, hliník, cihly, asfalt, kovodělné závody atd. Kromě toho soukromý sektor s využitím zvýhodněných půjček od státu vytváří a rozšiřuje asi 30 průmyslových podniků.

V Ázerbájdžánu se spolu s vytvářením nových podniků zrychluje výroba průmyslového zboží a zvyšuje se jeho konkurenceschopnost. V současné době průmyslové podniky v zemi spolu s potravinářskými výrobky vyrábějí mimo jiné různé stavební materiály, automobily, počítače, solární panely, elektrická zařízení, nábytek atd. Ázerbajdžán si zajišťuje mnoho vyrobeného zboží na úkor domácí výroby

Promyšlená politika, vytváření konkurenceschopných podniků založených na moderních technologiích, vytváří příležitosti pro exportní expanzi. Dnes je zboží některých průmyslových podniků vyváženo na zahraniční trhy a úspěšně konkuruje podobnému zboží.

Spolu s tím probíhají práce na vytvoření ropného a plynárenského a petrochemického komplexu, organizace práce ázerbájdžánského komplexu výroby oceli. V rámci tohoto komplexu, který zahrnuje proces od výroby železné rudy po výrobu finálních produktů, se plánuje vytvoření 5 závodů. Realizace těchto projektů má zvláštní význam z hlediska průmyslového rozvoje v zemi, jeho diverzifikace a rozvoje exportního potenciálu ropy.

V důsledku opatření přijatých během 11 měsíců roku 2014 vzrostl neropný průmysl o 7,8%. Pokud jde o výše uvedený akční plán, ministerstvo hospodářství a průmyslu za účelem zintenzivnění práce s průmyslovými podniky vytvořilo 8 pracovních skupin v různých sektorech hospodářství. V roce 2014 se konaly schůze pracovních skupin, které pacientům umožnily pečlivě sledovat vývoj příslušných odvětví a včas identifikovat vznikající problémy vyžadující objektivní a rychlé řešení.

Ve dnech 26. – 27. Listopadu se v Baku konala mezinárodní průmyslová konference „Industrializace ve 20. století: hlavní trendy, moderní přístup a zkušenosti v průmyslové politice“. Konference, které se zúčastnilo 350 zástupců z 21 zemí, včetně vysoce postavených úředníků, jakož i vedoucích zahraničních a místních společností, měla velký význam z hlediska prohlubování vazeb a výměny zkušeností v průmyslovém sektoru.

Kromě toho se vytváří speciální internetový portál, který poskytuje široké povědomí veřejnosti o průmyslovém sektoru a specializovaných lidských zdrojích.

V současné době ministerstvo pracuje na rekonstrukci průmyslových podniků a podpoře zakládání nových průmyslových zpracovatelských podniků, vytváření konkurenceschopných průmyslových podniků a do budoucna se předpokládá rozšíření rozsahu činností prováděných tímto směrem.

Jaká práce probíhá na rozvoji průmyslových parků? Očekává se nárůst počtu obyvatel chemického průmyslového parku Sumgayit? Existují plány na vytvoření průmyslových parků v jiných regionech země?

Státní politika realizovaná v zemi určuje všestranný rozvoj ekonomiky, včetně dynamického rozvoje a diverzifikace průmyslu založeného na špičkových technologiích. Za účelem zvýšení produkce konkurenceschopných průmyslových výrobků orientovaných na vývoz pokračují práce na organizaci činností chemického průmyslového parku Sumgayit (SHPP) a průmyslového parku Balakhani.

Na území zemědělského podniku, jehož základ byl položen v roce 2013 za účasti prezidenta, byly zbourány staré stavby, pozemky byly uvedeny do vhodného stavu. Území parku bylo rozšířeno ze 166,6 na 295,5 ha. Do konce roku 2015 se předpokládá dokončení první fáze výstavby infrastruktury zemědělského podniku. Závod na výrobu ocelových trubek rezidenta zemědělského podniku – LLC „Azertechnoline“ již funguje. Současně byla zahájena výstavba dalších dvou továren. Společnost SOCAR Polymer LLC, která je druhým obyvatelem parku, dováží zařízení pro výrobu. V roce 2016 plánuje společnost zahájit výrobní proces. V těchto dnech prošel registrací třetí obyvatel parku – AzerFloat CJSC. Na základě technologie Float (válcování v horké lázni) se CJSC bude zabývat výrobou izolačních skleněných desek. V rámci projektu bude závod zaměstnávat 150 lidí, roční objem výroby bude 8 milionů metrů čtverečních. metrů oken s dvojitým zasklením. Plánuje se vybudování závodu na výrobu tabulového skla.

Probíhají zejména práce na přilákání investorů a výměně zkušeností se zahraničními průmyslovými parky. Již ze strany potenciálních společností z Kanady, Německa, Řecka, Francie, Itálie a Turecka bylo obdrženo více než 20 investičních návrhů, které vyjádřily přání stát se rezidenty SHPP. Projekty se týkají hlavně obalů, stavebnictví, medicíny a také výroby chemických produktů a polymerů.

Hlavním cílem vytvoření průmyslového parku Balakhani je vytvoření vhodných podmínek pro podnikatele a investory se zájmem o reprodukci. V průmyslovém parku Balakhani, který v roce 2012 založil prezident Ilham Alijev, byly dokončeny práce na vytvoření vnější infrastruktury. V blízké budoucnosti bude na území průmyslového parku zahájeno vytváření výrobních závodů. K provádění činností v parku již 3 obyvatelé prošli registrací. V současné době pokračují práce na přilákání dalších podniků do průmyslového parku.

Spolu s hlavním městem zůstávají v regionech země pozornost zaměřena na opatření k posílení průmyslového potenciálu. V Ganji a Mingacheviru se tedy plánuje vytvoření průmyslových parků.

V říjnu prezident Ilham Alijev podepsal dekret o vytvoření průmyslových čtvrtí. Ve kterých regionech budou takové čtvrti vytvořeny?

Pro rozvoj podnikání v regionech a pro efektivní využití místního potenciálu je jedním z hlavních směrů vytváření průmyslových čtvrtí v různých městech a regionech. Vytváření takových čtvrtí má zvláštní význam, pokud jde o vytváření nových pracovních míst, rozšiřování výroby, rozvoj služeb, sociální a ekonomický rozvoj regionů, snižování nákladů na infrastrukturu při organizaci výrobního procesu, posilování vazeb spolupráce a rozvoj malých a středních podniků. Byl vypracován návrh „Vzorového nařízení o průmyslových čtvrtích“, který byl předložen příslušným vládním agenturám. Nyní úředníci ministerstva zvažují možnost vytvoření průmyslových čtvrtí v různých regionech republiky.

Průmyslový rozvoj je jedním z opatření v rámci politiky hospodářské diverzifikace. Jaká opatření přijme ministerstvo hospodářství a průmyslu ke zlepšení podnikatelského prostředí v zemi?

Rozvoj podnikání v Ázerbájdžánu je jednou z prioritních oblastí. Strategii rozvoje podnikání realizovanou pod vedením velkého vůdce Hejdara Alijeva v současné době úspěšně pokračuje ázerbájdžánský prezident Ilham Alijev. Podle strategie hlavy státu „Budoucí rozvoj země závisí na rozvoji podnikání“ soubor opatření nadále formuje konkurenceschopnou, na export orientovanou, mnohostrannou, inovativní ekonomiku, posiluje státní podporu podnikání, neustále zlepšuje podnikatelské prostředí v souladu s pokročilými inovacemi a rozvíjí vztahy mezi státem a podnikatelem. rozvoj malých a středních podniků v regionech, vzdělávání, rozvoj obchodních vazeb a poskytování různých služeb.

V důsledku přijatých opatření země významně liberalizovala postupy a pravidla pro regulaci podnikání, zjednodušila systém registrace podniků, zlepšila mechanismus státní finanční podpory pro malé a střední podniky, odstranila vývozní cla v zemi a snížila sazbu daně ze zisku na 20 %, byl vytvořen pracovní mechanismus na ochranu práv podnikatelů.

Za účelem rozvoje podnikání, pokračování v politice dalšího zlepšování podnikatelského a investičního prostředí a vytváření příznivého podnikatelského prostředí podepsal prezident dne 3. března 2014 dekret „O dalších opatřeních v souvislosti s rozvojem podnikání“. Vyhláška je indikátorem zvláštní pozornosti a péče o rozvoj podnikání, sledem opatření státní podpory soukromého sektoru, důležitým koncepčním dokumentem, který odráží právní základy nové fáze rozvoje podnikání.

Tento dokument spolu s plánem přijímání důležitých kroků ke zlepšení podnikatelského prostředí založeného na osvědčených postupech otevírá v Ázerbájdžánu v nadcházejících letech nové příležitosti pro jeho zlepšení.

Vyhláška stanoví provedení souboru reforem v 8 oblastech. Vyhláška nařídila přípravu příslušných návrhů na elektronickou registraci na principu „jediného okna“ osob zapojených do podnikatelské činnosti, včetně zkrácení postupů a času v oblasti získání stavebního povolení, organizace přijímání dokumentů v elektronické podobě v oblasti připojení k elektrické síti, minimalizace postupy, čas a náklady, snižování postupů, času a nákladů v oblasti státní registrace práv k nemovitostem, zlepšování činnosti institucí pro vydávání půjček, snižování dokladů, času a nákladů při exportně-importních operacích. Odpovídající práce v tomto směru pokračují.

Realizace těchto úkolů zlepší obchodní a investiční prostředí v zemi, zajistí zrychlený rozvoj neropného sektoru a podnikání.

Jaké oblasti budou prioritními oblastmi pro zvýhodněné půjčky v roce 2015?

Zvýhodněné půjčky od státu směřují do různých oblastí podnikání, včetně zajištění potravinového zabezpečení, zvýšení exportního potenciálu a investiční atraktivity regionů, zvýšení úrovně domácí soběstačnosti v potravinářských výrobcích v agrárně-průmyslovém komplexu a v dalších průmyslových oblastech, na financování investičních projektů pro rozvoj malých podniků.

V roce 2015 budou zvýhodněné půjčky od státu použity na zvýšení produkce neropných produktů, financování investičních projektů v reálném sektoru ekonomiky, mimo jiné s cílem rozšířit export zemědělských a potravinářských produktů, vytvoření logistických center (skladování, přeprava a prodej potravin a nepotravinářských produktů) a „ zelené trhy “(zemědělské obchody), zemědělské parky, velkochovy zvířat a skleníkové komplexy, velké zemědělské podniky a intenzivní zahradnické podniky, podniky na zpracování ovoce a zeleniny a další průmyslové podniky, a to i pro větší rozvoj malého podnikání.

Ázerbájdžánská investiční společnost je jedním z nástrojů na podporu rozvoje neropného sektoru. Před časem AIK ustoupila ze dvou projektů. Jaký je dnes objem portfolia dokončených projektů AIC? Kromě toho se AIC připojí k novým projektům jako akcionář? Jaké oblasti mohou projekty pokrývat?

AIC byla založena v roce 2006 s cílem podpořit rozvoj neropného sektoru v zemi prostřednictvím naléhavých investic.

Účelem investičních aktivit společnosti je zejména nákup kapitálové účasti na základním kapitálu, včetně akcií akciových společností a dalších obchodních organizací působících v neropném sektoru ekonomiky země, přilákání moderních a vyspělých technologií, zvýšení jejich konkurenceschopnosti, zvýšení jejich exportního potenciálu a zvýšení tržní hodnota naléhavých investic.

V současné době činí celkové náklady na projekty zahrnuté do investičního portfolia AIC přibližně 1,1 miliardy USD. S přímou účastí AIC byly k těmto projektům přilákány zahraniční investice ve výši přes 450 milionů USD.

Jako příklad projektů, ve kterých AIC působí jako akcionář, lze zmínit loděnici v Baku, novou cementárnu v regionu Garadagh, Holcim Ázerbajdžán, fungující na bázi technologie suché výroby.

AIK neustále prozkoumává nové investiční příležitosti. Z tohoto pohledu jsou prioritními oblastmi těžký a lehký průmysl, zemědělství, chemický průmysl, logistika, ICT a alternativní energie. Souběžně s přidělováním finančních prostředků provádí AIC pro projekty v neropném sektoru potřebnou analýzu, připravuje vhodný podnikatelský plán a finanční model, včetně pomoci místním podnikatelům a společnostem při získávání zahraničních investic. Zároveň společnost v projektech, na kterých se podílí, podporuje účetní systém v souladu s mezinárodními standardy a uplatňováním pokročilých principů podnikového řízení.

V současné době Azersun Holding s podporou ázerbájdžánské vlády buduje logistické centrum v Aktau. Plánuje Ázerbájdžán vytvořit logistická centra v jiných zemích, včetně Ruska? Ve kterých městech a kdy se očekává, že Ázerbajdžán vybuduje taková centra?

Všimněte si, že hlavním úkolem v současné fázi je urychlit diverzifikaci ekonomiky, dosáhnout vysoké míry rozvoje neropného sektoru a rozšířit jeho exportní příležitosti. Koncept rozvoje „Ázerbájdžán – 2020: Pohled do budoucnosti“ je založen na ekonomickém modelu exportní orientace. To si zase vyžádá provedení vládních podpůrných opatření k identifikaci nových exportních trhů a zlepšení konkurenceschopnosti. Za účelem vytvoření prvního logistického centra v zahraničí bylo podepsáno memorandum o porozumění mezi příslušnými strukturami Ázerbájdžánu a Kazachstánu v rámci projektu Aktau Production and Logistics Center. V Aktau již začala výstavba logistického centra.

Vytvoření logistického centra bude mít pozitivní dopad na rozšíření geografie vývozu v zemi, zvýšení objemu vývozu a posílení konkurenceschopnosti ázerbájdžánské značky.

Kromě toho se v budoucnosti, v souladu s geografií ázerbájdžánského vývozu, budou studovat vyhlídky na vytvoření logistických center v jiných zemích. Pokud jde o otázku vytváření takových logistických center v Rusku, zde existuje velký potenciál a vytváří základ pro vytvoření takové logistické infrastruktury. V současné době probíhají v tomto směru příslušné studie a myslím si, že podle jejich výsledků budou přijata nezbytná opatření.

Jak hodnotíte úroveň rusko-ázerbájdžánské spolupráce a jaké jsou plány na rok 2015 pro rozvoj vztahů mezi podnikateli obou zemí?

Spolupráce mezi Ázerbájdžánskou republikou a Ruskou federací se úspěšně rozvíjí a naše vztahy dosáhly úrovně strategického partnerství. Dohody uzavřené během vzájemných návštěv vedoucích obou zemí a dalších úředníků, podepsané dokumenty a řada akcí pořádaných za účasti obchodních kruhů Ázerbájdžánu a Ruska významně přispívají k rozvoji dvoustranných politických a hospodářských vztahů.

Mezi našimi zeměmi existuje silný právní rámec. Mezi Ázerbájdžánem a Ruskem bylo dosud podepsáno asi 170 dokumentů, a to i v ekonomické oblasti.

Obchod je jednou z důležitých oblastí spolupráce mezi oběma zeměmi. V loňském roce se obchodní obrat mezi Ázerbájdžánem a Ruskem zvýšil o 10,5% a dosáhl 2,6 miliardy amerických dolarů. V lednu až říjnu letošního roku došlo ve srovnání se stejným obdobím roku 2013 ke zvýšení vývozu neropných produktů do Ruska. Ruský trh je pro Ázerbájdžán tradiční a obě strany mají zájem na zvýšení vývozu produktů, zejména zemědělských. Ekonomický potenciál našich zemí vytváří velkou příležitost pro vzájemné investice. Za posledních 10 let ázerbájdžánská strana investovala přes 1 miliardu USD do přímých investic do ekonomiky Ruské federace. Jen v roce 2013 dosáhl tento údaj rekordní úrovně a činil 250 milionů USD. Objem ruských investic do ázerbájdžánské ekonomiky činí 1,8 miliardy USD.

V Ázerbájdžánu je registrováno 570 společností s ruským kapitálem, které působí v oblastech jako služby, stavebnictví, obchod, komunikace, průmysl, zemědělství, doprava, bankovnictví a pojišťovnictví. Ruské společnosti jsou také zapojeny do projektů realizovaných v Ázerbájdžánu jako dodavatel. Ázerbájdžánské společnosti jsou aktivní také v Rusku.

Upozorňujeme, že Ázerbájdžán také úspěšně spolupracuje s ruskými federálními subjekty.

Jak je uvedeno výše, za účelem podpory spolupráce mezi obchodními kruhy obou zemí se konají četné akce. Za posledních 5 let se tedy za účasti ázerbájdžánských a ruských podnikatelů uskutečnilo více než 30 obchodních fór a obchodních jednání. Jen v roce 2014 bylo uspořádáno 12 takových akcí. Zároveň existují velké příležitosti pro rozšíření vazeb mezi podnikateli z obou zemí. V tomto ohledu je nutné pořádat pravidelná setkání podnikatelů, výstavy a jiné podobné akce.

Jak ministerstvo hodnotí střednědobé vyhlídky ázerbájdžánské ekonomiky a jaká opatření jsou plánována k dosažení cíle zdvojnásobení HDP do roku 2020?

S přihlédnutím k ekonomickým trendům pozorovaným ve světě bude ve střednědobém horizontu v Ázerbájdžánu prioritou makroekonomická stabilita. Pozitivní tempo ekonomického vývoje, nízká inflace, stabilita národní měny – manat, konzervativní přístup k zahraničnímu dluhu, očekávané výrazné kladné platební bilance, prognózy týkající se objemu a dynamiky strategických devizových rezerv vytvářejí základ pro makroekonomickou odolnost ázerbájdžánské ekonomiky.

Rád bych poznamenal, že v důsledku opatření přijatých k diverzifikaci v posledních letech tempo růstu neropného průmyslu převyšuje tempo rozvoje ropného sektoru. Na základě vytvořeného ekonomického potenciálu se v letech 2015–2018 předpokládá hospodářský růst v průměru na 4,9% ročně, včetně neropného sektoru na 7,3%.

Hlavním úkolem v neropném odvětví, které je prioritní oblastí ekonomiky, je posílení průmyslového potenciálu země, zejména rozvoj neropného průmyslu a racionální využívání stávajících příležitostí. Ve střednědobém horizontu v důsledku prací provedených tímto směrem vzroste neropný průmysl v průměru o 7,8%.

Pokud jde o zlepšení životní úrovně obyvatelstva, bude i nadále prioritou zvyšování kvality služeb. Během tohoto období se očekává růst sektoru služeb v průměru o 8%.

Předpokládá se, že podíl tohoto sektoru na HDP vzroste z 30,2% v roce 2013 na 38,6% v roce 2018. To je indikátor rostoucí diverzifikace ekonomiky.

Výstavba hotelů splňujících nové moderní standardy, uvedení komplexu „Tufan“ v Gabale do provozu, turistického komplexu „Shahdag“ v Gusaru, pořádání prvních evropských her v roce 2015 a Islámských her solidarity v roce 2017 zvýší zisk ze služeb cestovního ruchu. Výsledkem je, že v letech 2015–2018 bude odvětví cestovního ruchu růst v průměru o 23,5% ročně a tato oblast se stane jednou z nejrychleji rostoucích.

Vývoj bude pokračovat v odvětví komunikací a informačních technologií. V roce 2015 se tedy očekává růst v této oblasti o 12,1%, v příštích 3 letech – v průměru o 12% ročně. V odvětví IKT budou vytvořeny nové příležitosti uvolněním nových telekomunikačních satelitů na oběžnou dráhu, výrobou vědecky náročných a nanotechnologických produktů v Hi-Tech Parku, rozšířením elektronických služeb a internetovým obchodováním.

Realizace velkých infrastrukturních projektů regionálního a místního významu, včetně uvedení železniční trati Baku-Tbilisi-Kars, mezinárodního obchodního přístavu Baku, vytvoření mezinárodních dopravních koridorů TRACECA a sever-jih, výstavby a rekonstrukce dálnic, uvedení nových stanic metra do provozu a mezinárodní letiště zajistí ve střednědobém horizontu rozvoj v odvětví dopravy. Očekává se tedy, že příští rok se v této oblasti bude vyvíjet na úrovni 7,5% a v příštích 3 letech – průměrně 7,6% ročně.

Ve střednědobém horizontu budou jedním z hlavních faktorů, které určují dynamický vývoj ekonomiky země, investice. Jako jeden z hlavních směrů realizované hospodářské politiky bude upřednostňováno přilákání zahraničních investic, vyspělých technologií a zkušeností.

Nyní, abychom implementovali koncepci rozvoje „Ázerbájdžán 2020: Pohled do budoucnosti“, jsou přijímána důsledná opatření, která zajistí rozvoj země v příštích letech, posílí její pozici ve světě a sociálně-ekonomický rozvoj populace.

Jsem si jist, že pružná, prozíravá, pragmatická politika prezidenta Ázerbájdžánu Ilhama Alijeva a diverzifikace ekonomiky, rozvoj neropného sektoru, přitahování moderních technologií a technologií k ekonomice, zlepšování podnikatelského a investičního prostředí, rozšiřování podnikatelské činnosti, rozvoj regionů, jsou prováděny v souladu s touto politikou, opatření sociální ochrany pomohou těchto cílů dosáhnout.

Abbas Akhundov, Anar Azizov

Sekvenování DNA

Princip

Sekvenováním zjistíme pořadí bazí (A,C,T,G) v konkrétním úseku DNA. Postup můžeme rozdělit do několika kroků:

1. PCR. Pomocí dvojice primerů amplifikujeme vybraný úsek DNA. Primery jsou specifické pro jedno konkrétní místo v jaderné nebo chloroplastové DNA. V jaderné (nukleární DNA, nDNA) se nejjednodušeji a nejčastěji sekvenují oblasti tzv. internal transcribed spaceru (ITS), které jsou přítomny až v desítkách tisíc kopií. Úseky chloroplastového genomu se také velmi jednoduše amplifikují, protože kruhových molekul cpDNA je v izolátu zpravidla velké množství. Často se sekvenují nekódující úseky (introny nebo spacery) jako např. trnL-trnF, psbA-trnH atd.

2. Přečištění (purifikace) PCR produktu. Zbylé primery a neinkorporované nukleotidy (dNTP) odstraníme pomocí komerčního kitu. To je velmi důležité, protože při následné sekvenační reakci je použit pouze jeden primer a také koncentrace dNTP musí být vybalancována vzhledem k ostatním složkám, především fluorescenčně značeným nukleotidům (ddNTP).

3. Cyklické sekvenování (cycle sequencing). Modifikovaná PCR reakce, při které použijeme pouze jeden sekvenační primer a PCR produkt jako templát. Nedochází tedy k exponenciální, ale pouze k lineární amplifikaci templátu. Kromě klasických dNTP jsou v sekvenační směsi přítomny i ddNTP (2´,3´-dideoxynukleotidtrisfosfáty). Ty jsou fluorescenčně značeny (každá baze jinou barvou) a při inkorporaci do vznikajícího řetězce DNA zamezí jeho dalšímu prodlužování. Výsledkem sekvenační reakce je tak směs různě dlouhých řetězců DNA a každý je fluorescenčně označen barvou podle toho, kterou bazí končí. Tyto produkty jsou pak elektroforeticky rozděleny na automatickém sekvenátoru a je možno přečíst posloupnost jednotlivých bazí. Sekvenuje se vždy jen s jedním primerem. Sekvenátor umožní číst cca 700 bazí, záleží na kvalitě PCR produktu a na sekvenci bazí. Pokud chceme sekvenovat delší úsek než cca 700 bazí, je třeba provést dvě sekvenační reakce s různými primery, s tzv. forward a reverse primerem. PCR produkt bude osekvenován z obou stran. Získané sekvence se potom spojí dohromady pomocí speciálního programu.

4. Purifikace produktů sekvenační reakce. Před analýzou na automatickém sekvenátoru je třeba produkty cyklického sekvenování přečistit, např. na Sephadexu.

5. Sekvenační analýza na automatickém sekvenátoru. V kapilárním sekvenátoru ABI PRISM 3130xl firmy Applied Biosystems jsou produkty cyklického sekvenování elektroforeticky rozděleny podle délky.

Protokol na PCR amplifikaci

Viz obecný protokol k PCR.

Přečištění PCR produktu pomocí JETquick kitu (GENOMED)

PCR produkt přečistíme pomocí kitu GENOMED Jetquick PCR Purification Spin Kit, který využívá tzv. „spin column technique“, tj. kolonky s membránou, na kterou se váže DNA. Alternativou je QIAGEN QIAquick PCR Purification Kit, případně můžeme přečistit fragment vyřízlý z gelu pomocí QIAquick Gel Extraction Kit.

Obecné

  • Před započetím práce zkontrolujeme přidání ethanolu do pufru H2 (zaškrtnutí políčka na lahvičce).
  • Do 1,5 ml eppendorfky odpipetujeme potřebný objem elučního pufru a předehřejeme na 60–70°C. v termobloku. Předehřátí pufru je důležité v případě eluce PCR produktu delšího než 5 kb.

Postup

    • Ke zbylým 20 µl PCR produktu přidáme 80 µl roztoku H1 a důkladně promícháme na vortexu.

Pozn.:V případě jiného objemu PCR reakce přepočteme množství H1 roztoku, aby zůstal poměr zachován.

  • Vložíme kolonku do označené 2 ml eppendorfky bez víčka (z kitu), přepipetujeme do ní směs z předchozího bodu.
  • Centrifugujeme 1 minutu při 13 000 rpm.
  • Odstraníme filtrát (to, co proteklo kolonkou), DNA zůstala vázána na membráně.
  • Vložíme kolonku zpět do 2 ml eppendorfky a přidáme 500 µl roztoku H2.
  • Centrifugujeme 1 minutu při 13 000 rpm.
  • Opět odstraníme filtrát (DNA vázaná na membráně je promyta).
  • Vložíme kolonku zpět do 2 ml eppendorfky a centrifugujeme 1 minutu při maximálních otáčkách (13 800 rpm), abychom důkladně odstranili roztok H2 z kolonky.
  • Vložíme kolonku do nové (a označené!) 1,5 ml eppendorfky (není součástí kitu) a přímo těsně nad střed membrány pipetujeme 30–75 µl TE pufru (příp. sterilní vody) předehřátého na 60–70°C.
  • 5 min inkubujeme na stole
  • Centrifugujeme 2 min při 13 000 rpm (DNA je eluována).
  • DNA dále skladujeme při –20 °C .

Příprava vzorků pro sekvenování DNA

  • Pro optimální průběh sekvenační reakce je potřeba zvolit správný poměr koncentrace primeru ku PCR produktu.
  • Změříme koncentraci DNA pomocí spektrofotometru Biowave II
  • Pracujeme na ledu a v Biohazard boxu
  • Do 0,2 ml eppendorfek určených pro sekvenaci pipetujeme přečištěnou DNA v množství dle délky PCR produktu (viz tabulka), 3–5 pmol primeru a sterilní vodu do celkového objemu 15 µl.
Templát Množství
Kit 3.1 Kit 1.1
PCR produkty
100–200 bp 1–3 ng 1–3 ng
200–500 bp 3–10 ng 3–10 ng
500–1000 bp 5–20 ng 5–20 ng
1000–2000 bp 10–40 ng 10–40 ng
>2000 bp 20–50 ng 40–100 ng
ssDNA 25–50 ng 50–100 ng
dsDNA 150–300 ng 200–500 ng
  • Množství templátové DNA závisí na naměřené koncentraci (pro každý vzorek podle koncentrace PCR produktu spočítáme kolik µl je potřeba, aby v reakci bylo přítomno např. 20 ng DNA a podle toho upravíme množství vody pro příslušný vzorek).
  • Poklepem na eppendorfku prsty promícháme a krátce stočíme na stolní centrifuze a odneseme do sekvenčního centra v přízemí UMBR AV ČR, kde provedou cyklické sekvenování, přečištění sekvenční reakce a také sekvenční analýzu v 16 –ti kapilárním sekvenátoru.
  • Sekvenční centrum používá 2 sekvenační kity. Standardně používáme k sekvenaci 3.1 Cycle Sequencing Kit. 1.1 Cycle Sequencing Kit je lepší použít pokud je pro nás důležitý počátek sekvence studovaného úseku.

NARCONON – ZÁCHRANA ŽIVOTŮ PŘED DROGOVOU ZÁVISLOSTÍ A REHABILITACE A PREVENCE

NARCONON EVROPA - ZÁCHRANA ŽIVOTŮ PŘED DROGOVOU ZÁVISLOSTÍ A REHABILITACE A PREVENCE
NARCONON EVROPA – ZÁCHRANA ŽIVOTŮ PŘED DROGOVOU ZÁVISLOSTÍ A REHABILITACE A PREVENCE

Narconon byl založen v roce 1966 vězněm, který k ukončení své desetiletí trvající závislosti použil spisy autora, humanisty a zakladatele scientologie L. Rona Hubbarda. Dnes Narconon představuje celosvětovou síť, která denně pomáhá lidem zotavit se z devastace vzniklé drogovou závislostí.

Slavnostní otevření Narconon Europe v Dánsku
Slavnostní otevření Narconon Europe v Dánsku

Metody prevence a rehabilitace drog Narconon, života bez drog pro všechny, kombinují přesný režim, který vyloučí zbytky drog z těla, s postupy ke zmírnění duševní a fyzické úzkosti spojené s drogami.

Vítá vás Narconon Evropa
Vítá vás Narconon Evropa

Narconon se nezabývá pouze oslabujícími účinky zneužívání drog na mysl i tělo, ale především řeší důvody, proč se člověk drogy začal brát. Tento program doposud pomohl desítkám tisíc lidí začít nový život bez drog.

Vítá vás Narconon Evropa
Vítá vás Narconon Evropa

Ale Narconon tím nekončí; prostřednictvím svého vzdělávacího a preventivního programu se snaží informovat mladé lidi a dospělé o drogách a zneužívání drog. Doposud odborníci na drogovou výchovu Narconon přímo oslovili více než 16 milionů jednotlivců.

Vítá vás Narconon Evropa
Vítá vás Narconon Evropa

Skutečné svobody pro jednotlivce nelze dosáhnout ve světě plném závislostí na drogách. Proto se Scientologická církev nabízí  programy, které účinně řeší tento společenský problém.

MAAG CZ, s.r.o. IČO: 26928884

Datum vzniku a zápisu: 12. května 2004
Spisová značka: C 46186 vedená u Krajského soudu v Brně
Obchodní firma: MAAG CZ, s.r.o.

MAAG CZ, s.r.o. IČO: 26928884
MAAG CZ, s.r.o. IČO: 26928884

Sídlo: Vídeňská 262/125c, Přízřenice, 619 00 Brno
Identifikační číslo: 26928884
Právní forma: Společnost s ručením omezeným
Předmět podnikání: zednictví
výroba, obchod a služby neuvedené v přílohách 1 až 3 živnostenského zákona
Statutární orgán:
jednatel:

Ing. MARTIN MICHALKO, dat. nar. 6. srpna 1966
82104 Bratislava, Jakabova, Slovenská republika
Den vzniku funkce: 21. října 2015
Způsob jednání:
Způsob jednání za společnost: Jménem společnosti jedná a podepisuje jednatel.
Společníci:
Společník:
Ing. MARTIN MICHALKO, dat. nar. 6. srpna 1966
82104 Bratislava, Jakabova 3619/43, Slovenská republika

Podíl:
Vklad: 200 000,- Kč
Splaceno: 200 000,- Kč
Obchodní podíl: 100%
Druh podílu: základní
Kmenový list: nebyl vydán
Základní kapitál:
200 000,- Kč
Ostatní skutečnosti:
Počet členů statutárního orgánu: 1

Sultrade Praha, spol. s r.o. CZ61456152

SULTRADE Praha, spol. s r.o.
IČO: 61456152
Z. KAPITÁL: 2.7 miliony Kč
SCHRÁNKA: ija5cef
DIČ (DPH): CZ61456152, Detail plátce DPH
ADRESA: Bělohorská 238/85, Břevnov (Praha 6), 169 00 Praha

Sultrade Praha, spol. s r.o. CZ61456152
Sultrade Praha, spol. s r.o. CZ61456152

Datum vzniku a zápisu 30. březen 1994
Spisová značka C 27768/MSPH Městský soud v Praze
Obchodní firma SULTRADE Praha, spol. s r.o.
Sídlo Bělohorská 238/85, 169 00 Praha
Identifikační číslo 61456152
Právní forma Společnost s r.o.
Předmět podnikání obstaravatelská činnost v oblasti obchodu
koupě zboží za účelem jeho dalšího prodeje a prodej (vyjma činností uvedených v příl.2 a 3 zák.č.455/91 sb.)
engineering v oblasti farmacie, chemické výroby a technologie
činnost účetních poradců, vedení účetnictví
výroba kovových konstrukcí, kotlů, těles a kontejnerů
výroba strojů a zařízení pro využití mechanické energie
montáž, opravy, revize a zkoušky elektrických zařízení
montáž, opravy, revize a zkoušky plynových zařízení a plnění nádob plyny
montáž, opravy, revize a zkoušky tlakových zařízení a nádob na plyny
Statutární orgán
Jednatel
Vladimír Klápa
okres Benešov
Den vzniku funkce: 1. duben 2013
Jednatel
Ing. Petr Kostadinov
Hostivice
Den vzniku funkce: 30. březen 1994
Způsob jednání
Způsob jednání jménem společnosti: Společnost je zastupována a za ni se podepisuje ve všech věcech jednatel, a to samostatně.
Společníci
Společník
Ing. Petr Kostadinov
Hostivice
Podíl: Vklad: 2 739 000,-Kč
Splaceno: 100.00%
Obchodní podíl: 100.00 %
Základní kapitál 2 739 000,-Kč